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人(TREM-1)酶聯(lián)免疫分析 試劑盒 人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)酶聯(lián)免疫分析 試劑盒
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍：
96T
1ng/L – 80ng/L
使用目的：
本試劑盒用于測定人血漿及相關(guān)液體樣本中髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)水平。用純化 的人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中 依次加入髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)，再與 HRP 標(biāo)記的髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1) 抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值)， 通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)濃度。
ELISA試劑盒組成：
試劑盒組成48 孔配置96 孔配置保存
說明書1 份1 份
封板膜2 片(48)2 片(96)
密封袋1 個1 個
酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品：540μg/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶標(biāo)試劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
終止液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
濃縮洗滌液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存
2. 加樣：分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl(樣品最終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底 部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定：以空白孔調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)酶聯(lián)免疫分析 試劑盒操作程序總結(jié)：
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋
倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未
用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好 控制在 5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的 OD 值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定， 計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
人(TREM-1)酶聯(lián)免疫分析 試劑盒 人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)酶聯(lián)免疫分析 試劑盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存：;2-8℃。
2.有效期：6 個月
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