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小鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A1(UGT1A1)ELISA試劑盒技術(shù)說(shuō)明書(shū)
BS-2682小鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A1(UGT1A1)ELISA試劑盒
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒采用雙抗體夾心法ELISA技術(shù),通過(guò)預(yù)包被小鼠UGT1A1單抗的微孔板捕獲樣本中的目標(biāo)抗原,再與HRP標(biāo)記的二抗形成復(fù)合物。經(jīng)TMB底物顯色后,450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),其與UGT1A1濃度呈正相關(guān)^^1^^。
試劑盒組成
核心組件:
預(yù)包被微孔板(96孔,12條×8孔)
UGT1A1標(biāo)準(zhǔn)品(78-5000pg/ml梯度濃度)
HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體、顯色劑(TMB)、終止液
濃縮洗滌液(需30倍稀釋)
輔助材料:樣本稀釋液、封板膜、密封袋等。
操作步驟
樣本處理:
血清/血漿:3000rpm離心10分鐘,避免溶血;若需保存,-20℃分裝防反復(fù)凍融。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋:
原倍標(biāo)準(zhǔn)品(5000pg/ml)按2倍梯度稀釋至5個(gè)濃度點(diǎn)。
加樣與孵育:
每孔加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50μl,37℃孵育30分鐘;
洗滌5次后加入HRP抗體,重復(fù)孵育。
顯色與測(cè)定:
加入TMB避光顯色15分鐘,終止液終止反應(yīng)后讀取OD值。
注意事項(xiàng)
樣本要求:避免NaN3(抑制HRP活性),溶血樣本需重新采集。
操作規(guī)范:
加樣時(shí)避免觸碰孔壁,顯色前搖勻試劑;
超范圍樣本需用稀釋液調(diào)整后復(fù)測(cè)。
保存條件:試劑盒2-8℃避光保存,使用前室溫平衡20分鐘。
數(shù)據(jù)計(jì)算
通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合樣本OD值,乘以稀釋倍數(shù)(若有)得實(shí)際濃度。
注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。
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