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選擇一款合適的96孔PCR板。不同的實驗目標、儀器和流程對耗材有著截然不同的要求。選錯板子可能導致信號微弱、重復性差、甚至實驗失敗。本指南將帶您一步步完成精準匹配,確保您的qPCR實驗結果可靠無誤。
第一步:明確核心實驗類型——這是選擇的基礎
您的實驗應用直接決定了所需板子的首要特性。
標準定量PCR (qPCR):
關鍵需求:良好的光學透明度和密封性。
推薦:透明板或白色板均可。如需更高靈敏度和抗串擾能力,白色板是優選。
高靈敏度檢測(如低豐度基因、單細胞測序):
關鍵需求:信號采集,最小化背景噪音。
推薦:白色板選擇。其白色壁/底能有效反射熒光信號,顯著提升信噪比和檢測靈敏度。
快速PCR / 高速循環:
關鍵需求:熱傳導效率,確保孔間溫度一致。
推薦:選擇明確標注 “超薄壁" 的板子,以實現最快的升降溫速率。
高通量篩查、基因分型:
關鍵需求:避免樣本交叉污染,適應自動化工作站操作。
推薦:選擇帶有全裙邊的板子,機械強度高,便于機械臂抓取。同時必須確保密封性絕對可靠。
第二步:匹配您的qPCR儀器——這是“專用"的關鍵 本生96孔PCR板
這是最關鍵的一步,不兼容會導致儀器無法識別或檢測失敗。
光學系統:
從頂端讀取光信號的儀器(如ABI QuantStudio系列, Roche LightCycler® 480):必須使用透明蓋或光學密封膜。
從底部讀取光信號的儀器(如Bio-Rad CFX系列, Eppendorf Realplex):必須關注板底材質。
白色板底:增強熒光信號,減少孔間串擾,適用于絕大多數實驗,是通用且高性能的選擇。
透明板底:透光性最好,但可能產生更多串擾。適用于需要高透光率的特殊應用。
儀器型號:
嚴格兼容性:許多儀器有“專用"板(如Roche 480專用板)。購買前務必在產品說明中確認 “[您的儀器型號]"。
物理尺寸:確保板子的高度、裙邊設計能嚴絲合縫地放入您儀器的樣品槽中。
第三步:詳解關鍵性能參數——看懂產品說明
材質:
聚丙烯 (PP):主流材質,需為超高純度PCR級,確保無DNA酶、RNA酶、人類基因組DNA污染,且不會抑制PCR反應。
裙邊類型:
無裙邊:便宜,但機械強度弱,易彎曲,主要用于手工操作。
半裙邊:周邊有一圈凸起,便于標記和拿取,提供一定機械強度。
全裙邊:堅固,適合自動化操作,可嵌入條形碼進行樣品追蹤。
密封方式:
光學平蓋:一次性使用,與白色板搭配是黃金標準,提供最佳光學性能和密封性。
光學密封膜:需配合壓膜器使用,密封性好,適用于高通量應用。
凸蓋/圓蓋:可重復使用,密封性不如平蓋和膜,有蒸發風險,不推薦用于精密定量實驗。
第四步:特殊考量
無菌 & 無酶:大多數商業PCR板已保證無DNase/RNase。如果實驗對污染極度敏感(如NGS建庫),可選擇經認證預滅菌(如伽馬射線)的產品。
預制孔板:有些板子出廠時已預置了ROX等被動參比染料,專為需要染料校正的儀器系統(如部分ABI機型)設計,購買時需注意區分。
快速選擇流程圖
開始 → 您的qPCR儀器型號是什么? → 選擇該儀器兼容的板型
↓
您的實驗需要高靈敏度嗎? → 是 → 選擇白色板 + 光學平蓋/密封膜
↓
否 → 透明板亦可
↓
您使用自動化工作站嗎? → 是 → 選擇全裙邊設計
↓
否 → 半裙邊或無裙邊即可
↓
您的實驗周期非常短嗎? → 是 → 確認選擇“超薄壁"
↓
結束 → 確認訂單!
總結
為實驗精準匹配96孔PCR板,只需遵循以上四步:
定應用(靈敏度 通量 )
對儀器(光路 型號 )
看參數(材質 裙邊?密封 )
查特殊(無菌 預置染料 )
注:以上資料僅供參考,具體其他信息請咨詢技術老師或品牌供應商。
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